光度分析的方法
(1)目视比色法
用眼睛比较溶液颜色的深浅以确定待测组分含量的方法,称为目视比色法。最常用的是标准系列法。它是用一套质料相同、大小形状相同、带有刻度、等体积的比色管组成。将一系列不同体积的标准溶液依次加入比色管中,取一定量的待测溶液置于另一比色管中,然后分别加入等量的显色剂及其它试剂,最后用水稀释至刻度(比色管容量有10、25、50、100mL等几种)。摇匀并放置一定时间待反应达平衡后,从管口垂直向下观察,比较待测液与标准溶液颜色的深浅。若待测液与某一标准液颜色深度一致,则说明两者浓度相等;如果待测液的颜色深度介于某相邻两标准之间,则取其平均值作为待测液的浓度。
目视比色法仪器简单、操作简便、灵敏度也较高、显色反应如不遵从比耳定律也能进行。因而它被广泛应用于准确度要求不高的常规分析中。
目视比色法的主要缺点是准确度不高,如果待测溶液中存在第二种有色物质,甚至无法进行测定。另外,由于许多有色溶液颜色不够稳定,标准系列不能久存,经常在测定时需同时配制。
(2)光度分析法
通常,将使用光电比色计测定有色溶液的吸光度进行定量分析的方法称为光电比色法,将使用分光光度计进行测定的方法称为分光光度法。两种方法的测定原理是相同的,所不同的仅在于获得单色的方法不同,光电比色法是采用滤光片,而分光光度法是利用棱镜或光栅单色器。由于两者均基于吸光度的测定,所以可统称为光度分析法。操作步骤都是测量一系列标准溶液的吸光度,绘制工作曲线。并在相同条件下,测量待测试样的吸光度,由工作曲线上查出试样中待测物的含量。
光度法与目视比色法比较,具有下列优点:
a.使用仪器代替人眼进行测量,消除了人工的主观误差,从而提高了准确度。
b.测定溶液中有其它有色物质共存时,可以选择适当的单色光和参比溶液来消除干扰,因而可提高选择性。
c.使用标准曲线法可简化手续,加快分析速度。
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